Enterococcus faecalis causes osteitis deformans in aGolden Lancehead snake (Bothrops insularis): a case report / Enterococcus faecalis causa osteíte deformante em uma serpente Jararaca-ilhoa (Bothrops insularis): relato de caso

Osteitis deformans (Paget's disease) is a chronic bone disorder characterized by excessive osteoclast-mediated bone resorption followed by new bone formation. The present paper reports this condition in an 18-year-old captive golden lancehead (Bothrops insularis) from Brazil. This patient initially exhibited anorexia and swelling in the middle third of the spine associated with locomotor disability. For diagnosis, radiography, ultrasound, computed tomography, cytology, and microbiological culture were performed. Diagnostic imaging showed bone changes, vertebral fusion, and bone proliferation. Cytology revealed blood cells how toxic heterophiles, reactive monocytes, young red blood cells, and polychromasia compatible with an infectious process. A bacterial culture identified an ampicillin-susceptible strain of Enterococcus faecalis. Antibiotic treatment was promptly started, but the snake died 25 days later. Histopathologically, the bone tissue showed a generalized thickening of the vertebral trabeculae. For the first time, the presence of E. faecalisassociated with the development of osteitis deformans in snakes was presented.(AU)

Osteíte deformante (Doença de Paget) é um distúrbio ósseo crônico caracterizado por reabsorção óssea excessiva mediada por osteoclastos, seguida por nova formação óssea. O presente trabalho relata essa condição em uma serpente jararaca-ilhoa (Bothrops insularis) do Brasil de 18 anos. O paciente apresentou inicialmente anorexia e um inchaço no primeiro terço médio da coluna associado com a incapacidade locomotora. O diagnóstico foi estabelecido com o apoio de radiografia, ultrassonografia, tomografia computadorizada, citologia e cultura microbiológica. O diagnóstico por imagem mostrou alterações ósseas, fusão de vértebras e proliferação óssea. A citologia mostrou células sanguíneas como heterófílos tóxicos, monócitos reativos, células sanguíneas jovens e policromasia compatíveis com um processo infeccioso. A cultura bacteriana identificou uma cepa de Enterococcus faecalis suscetível à ampicilina. O tratamento com antibióticos foi iniciado imediatamente, mas a serpente morreu 25 dias depois. Histopatologicamente, o tecido ósseo mostrou um espessamento generalizado das trabéculas vertebrais. Portanto, foi demonstrado pela primeira vez a presença de E. faecalis associada ao desenvolvimento de osteíte deformante em uma serpente.(AU)

Fatal pulmonary parafilaroidiasis in a free-ranging subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) coinfected with two gammaherpesviruses and Sarcocystis sp / Parafilaroidose pulmonar fatal em um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) de vida livre coinfectado com dois gammaherpesvírus e Sarcocystis sp

Abstract A juvenile subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) found dead in Santa Catarina state, southern Brazil, presented with disseminated verminous pneumonia due to Parafilaroides sp. A concomitant infection with two different gammaherpesviruses was identified by PCR in different tissues; one of them possibly a novel species (tentatively named Otariid herpesvirus 7). Sarcocystis sp. DNA was identified molecularly in skeletal muscle samples with intrasarcoplasmic bradyzoites and no apparent tissue response. All analyzed samples (mandibular, laryngeal, tracheal, and mesenteric lymph nodes, and lung) were PCR-negative for Brucella spp. The most likely cause of death was severe pulmonary parafilaroidiasis. The pathogenic role of the gammaherpesviruses in several of the tissues was not evident. This study describes the pathogenicity of Parafilaroides sp. in a subantarctic fur seal, widens the host range of herpesvirus in pinnipeds, and reports the first molecular identification of Sarcocystis sp. in this species.

Resumo Um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) juvenil foi achado morto no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil, apresentando pneumonia parasitária disseminada por Parafilaroides sp. Infecção concomitante por dois gammaherpesvírus diferentes foi identificada pela PCR em diversos tecidos, um desses herpesvírus possivelmente uma nova espécie (denominada provisoriamente Otariid herpesvirus 7). DNA de Sarcocystis sp. foi identificado molecularmente em amostras de músculo esquelético que apresentavam bradizoítos intra-sarcoplasmáticos sem aparente resposta tecidual. Todas as amostras analisadas (linfonodo mandibular, laríngeo, traqueal e mesentérico, e pulmão) pela PCR para Brucella spp. foram negativas. A causa mais provável da morte do animal foi parafilaroidose pulmonar severa. O papel patogénico dos gammaherpesvírus em vários tecidos não foi evidente. Este estudo descreve a patogenicidade de Parafilaroides sp. em um lobo-marinho-subantártico, amplia a variedade de hospedeiros de herpesvírus em pinípedes e reporta a primeira identificação molecular de Sarcocystis sp. para essa espécie.

Toxoplasma gondii in cetaceans of Brazil: a histopathological and immunohistochemical survey / Toxoplasma gondii em cetáceos do Brasil: estudo histopatológico e imuno-histoquímico

Abstract Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. In cetaceans, T. gondii infection is a significant cause of morbidity and mortality. Despite the worldwide range and broad cetacean host record of T. gondii infection, there is limited information on toxoplasmosis in cetaceans from the Southern hemisphere. We investigated the occurrence of T. gondii by histopathology and immunohistochemistry in tissue samples of 185 animals comprising 20 different cetacean species from Brazil. Three out of 185 (1.6%) animals presented T. gondii-associated lesions: a captive killer whale Orcinus orca, a free-ranging common bottlenose dolphin Tursiops truncatus and a free-ranging Guiana dolphin Sotalia guianensis. The main lesions observed in these animals were necrotizing hepatitis, adrenalitis and lymphadenitis associated with protozoal cysts or extracellular tachyzoites presenting immunolabeling with anti-T. gondii antibodies. This study widens the spectrum of species and the geographic range of this agent in Brazil, and provides the first reports of T. gondii infection in a captive killer whale and in a free-ranging common bottlenose dolphin in South America.

Resumo Toxoplasmose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. A infecção por T. gondii é uma causa significativa de morbidade e mortalidade, nos cetáceos. Apesar da abrangência mundial e amplo registro de espécies de cetáceos infectadas por T. gondii, informações sobre toxoplasmose em cetáceos do hemisfério sul são limitadas. Neste estudo pesquisou-se por meio de histopatologia e imuno-histoquímica a ocorrência de T. gondii em amostras de tecido de 185 animais, compreendendo 20 diferentes espécies de cetáceos que ocorrem no Brasil. Três dos 185 (1,6%) animais apresentaram lesões associadas a T. gondii: uma orca Orcinus orca mantida em cativeiro, um golfinho-nariz-de-garrafa Tursiops truncatus e um boto-cinza Sotalia guianensis de vida livre. As principais lesões observadas nesses animais foram hepatite, adrenalite e linfadenite necrotizantes associadas a cistos protozoários ou taquizoítos extracelulares, marcados com anticorpos anti-T. gondii. O presente estudo amplia o espectro de espécies susceptíveis a esse agente e o seu alcance geográfico no Brasil, fornecendo o primeiro relato da infecção por T. gondii em uma orca mantida em cativeiro e em um golfinho-nariz-de-garrafa de vida livre na América do Sul.

Comparative morphometric evaluation of hepatic hemosiderosis in wild Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) infected with different Plasmodium spp. subgenera / Avaliação morfométrica comparativa da hemossiderose hepática em pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) de vida livre infectados por diferentes subgêneros de Plasmodium spp

Abstract Avian malaria is one of the most important diseases of captive penguins. We employed morphometric techniques to evaluate hepatic hemosiderosis in rehabilitating wild Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) that were negative (n = 9) or naturally infected by different subgenera of Plasmodium spp. (n = 24), according with: Plasmodium subgenera (Haemamoeba, Huffia, Other lineages, and Unidentified lineages), severity of Plasmodium histopathological lesions, and concurrent diseases, age class (juvenile or adult plumage), sex (male, female or not determined), body score (emaciated, thin, good, excellent, not available), molt, presence or absence of oil contamination upon admission, iron supplementation, and rehabilitation center. The percentage of the area occupied by hemosiderin was called 'Index of Hepatic Hemosiderosis (IHH)'. Plasmodium-positive females presented significantly higher IHH values (17.53 ± 12.95%) than males (7.20 ± 4.25%; p = 0.041). We observed higher levels of congestion (p = 0.0182) and pneumonia (p = 0.0250) severity between Unidentified lineages vs. Huffia. We believe that the hepatic hemosiderosis observed in this study was multifactorial, the result of pathological processes caused by malaria, molting, hemoglobin and myoglobin catabolism during migration, anemia, concomitant diseases, and iron supplementation, all possibly potentiated by decreased liver mass. Further studies are needed to clarify the mechanisms of these hypotheses.

Resumo Malária aviária é uma das mais relevantes doenças em pinguins cativos. Foram aplicadas técnicas morfométricas para avaliar a hemossiderose hepática em pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus ) de vida livre em reabilitação negativos (n = 9) e naturalmente infectados por diferentes subgêneros de Plasmodium spp. (n = 24), quanto a: subgênero de Plasmodium (Haemamoeba , Huffia, Outras Linhagens, e Linhagens não identificadas), severidade das lesões histopatológicas causadas por Plasmodium e doenças concomitantes, faixa etária (plumagem juvenil ou adulta), sexo (macho, fêmea, indeterminado), condição corporal (emaciado, magro, bom, excelente, indisponível), muda, presença/ausência de óleo a admissão, suplementação de ferro, e centro de reabilitação. A porcentagem da área ocupada por hemossiderina foi denominada "Índice de Hemossiderose Hepática (IHH)". Fêmeas Plasmodium -positivas apresentaram IHH significativamente mais elevado que machos, respectivamente, 17,53 ± 12,95% e 7,20 ± 4,25% (p = 0,041). Níveis mais elevados de congestão (p = 0,0182) e pneumonia (p = 0,0250) foram observados entre Linhagens não identificadas vs. Huffia. Possivelmente, a hemossiderose hepática observada nesse estudo seja multifatorial, resultado de processos patológicos causados por malária, muda, catabolismo de hemoglobina e mioglobina durante a migração, anemia, doenças concomitantes e suplementação de ferro, potencialmente intensificados por massa hepática reduzida. Estudos complementares são necessários para esclarecer os mecanismos de tais hipóteses.

Fatal toxoplasmosis in a southern muriqui (Brachyteles arachnoides) from São Paulo state, Brazil: Pathological, immunohistochemical, and molecular characterization

We report the pathological, immunohistochemical, and molecular features of fatal acute systemic toxoplasmosis in an adult, female, free­living southern muriqui (Brachyteles arachnoides) from São Paulo state, Brazil. PCR­RFLP genotyping analysis identified the #21 genotype of Toxoplasma gondii. This represents the first report of acute toxoplasmosis involving this genotype in humans and animals.

Relatamos as características patológicas, imuno-histoquímicas e moleculares da toxoplasmose sistêmica aguda fatal em um muriqui do sul adulto (feminino) de vida livre (Brachyteles arachnoides) do estado de São Paulo, Brasil. A análise de genotipagem por PCR ­ RFLP identificou o genótipo # 21 de Toxoplasma gondii. Isso representa o primeiro relato de toxoplasmose aguda envolvendo esse genótipo em humanos e animais

Negative serosurvey of Toxoplasma gondii antibodies in Golden-headed Lion Tamarin (Leontopithecus chrysomelas) from Niterói/RJ, Brazil / Pesquisa sorológica de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em Mico-leão-da-cara-dourada (Leontopithecus chrysomelas) de Niterói/RJ, Brasil

Abstract New World Nonhuman Primates are highly susceptible to clinical toxoplasmosis. Serum samples from 126 recently captured Leontopithecus chrysomelas, from an exotic and invasive population, were tested for Toxoplasma gondii antibodies by the modified agglutination test (MAT, cut-off 1:25); all were seronegative. The MAT is highly specific and is not species-specific. This is the first report of T. gondii survey in this tamarin in the wild. This result is consistent with prior reports that showed the high susceptibility of the species to infection by T. gondii usually with high mortality rates.

Resumo Primatas não humanos são extremamente susceptíveis a toxoplasmose. No presente estudo, 126 Leontopithecus chrysomelas foram capturados de uma população de vida livre, exótica e invasora, e amostras de soros foram testadas para a presença de anticorpos anti- Toxoplasma gondii pelo Teste de Aglutinação Modificado (MAT, ponto de corte 1:25). Todos os animais testados foram negativos. O MAT é um teste altamente específico e não é espécie-específico. Esse é o primeiro estudo de pesquisa por anticorpos anti- T. gondii nessa espécie em vida livre. O resultado corrobora com o conhecimento prévio sobre a susceptibilidade dessa espécie a infecção pelo parasite T. gondii.

Outbreak of Yellow Fever among Nonhuman Primates, Espirito Santo, Brazil, 2017

In January 2017, a yellow fever outbreak occurred in Espirito Santo, Brazil, where human immunization coverage is low. Histologic, immunohistologic, and PCR examinations were performed for 22 deceased nonhuman New World primates; typical yellow fever features were found in 21. Diagnosis in nonhuman primates prompted early public health response.

Em janeiro de 2017, ocorreu um surto de febre amarela no Espírito Santo, Brasil, onde a cobertura de imunização humana é baixa. Os exames histológico, imuno-histológico e PCR foram realizados para 22 primatas não humanos do Novo Mundo falecidos; características típicas da febre amarela foram encontradas em 21. O diagnóstico em primatas não humanos levou a uma resposta precoce da saúde pública.

Fatal haemorrhage and neoplastic thrombosis in a captive African lion (Panthera leo) with metastatic testicular sex cord­stromal tumour

Background: The study of neoplasia in wildlife species contributes to the understanding of cancer biology, management practices, and comparative pathology. Higher frequencies of neoplasms among captive non-domestic felids have been reported most commonly in aging individuals. However, testicular tumours have rarely been reported. This report describes a metastatic testicular sex cord­stromal tumour leading to fatal haemorrhage and thrombosis in a captive African lion (Panthera leo). Case presentation: During necropsy of a 16-year-old male African lion, the left testicle and spermatic cord were found to be intra-abdominal (cryptorchid), semi-hard and grossly enlarged with multiple pale-yellow masses. Encapsulated haemorrhage was present in the retroperitoneum around the kidneys. Neoplastic thrombosis was found at the renal veins opening into the caudal vena cava. Metastases were observed in the lungs and mediastinal lymph nodes. Histology revealed a poorly differentiated pleomorphic neoplasm comprised of round to polygonal cells and scattered spindle cells with eosinophilic cytoplasm. An immunohistochemistry panel of inhibin-α, Ki-67, human placental alkaline phosphatase, cytokeratin AE1/AE3, cKit, vimentin and S100 was conducted. Positive cytoplasmic immunolabeling was obtained for vimentin and S100. Conclusions: The gross, microscopic and immunohistochemical findings of the neoplasm were compatible with a poorly differentiated pleomorphic sex cord­stromal tumour. Cause of death was hypovolemic shock from extensive retroperitoneal haemorrhage and neoplastic thrombosis may have contributed to the fatal outcome. To our knowledge, this is the first report of sex cord­stromal tumour in non-domestic felids.

Antecedentes: O estudo da neoplasia em espécies silvestres contribui para a compreensão da biologia do câncer, manejo práticas e patologia comparada. Maiores frequências de neoplasias em felinos não domésticos em cativeiro foram relatados mais comumente em indivíduos idosos. No entanto, tumores testiculares raramente foram relatados. este O relatório descreve um tumor estromal do cordão sexual testicular metastático, levando a hemorragia fatal e trombose em um leão africano em cativeiro (Panthera leo). Apresentação do caso: Durante a necropsia de um leão africano de 16 anos, o testículo esquerdo e o cordão espermático foram encontrado intra-abdominal (criptorquídeo), semi-rígido e grosseiramente aumentado com várias massas amarelo-pálidas. Encapsulado hemorragia estava presente no retroperitônio ao redor dos rins. Trombose neoplásica foi encontrada em as veias renais se abrem para a veia cava caudal. Metástases foram observadas nos pulmões e na linfa mediastinal nós. A histologia revelou uma neoplasia pleomórfica pouco diferenciada composta por células redondas a poligonais e células fusiformes dispersas com citoplasma eosinofílico. Um painel de imuno-histoquímica de inibina-α, Ki-67, humano foram realizadas fosfatase alcalina placentária, citoqueratina AE1 / AE3, cKit, vimentina e S100. Citoplasmático positivo a marcação imunológica foi obtida para vimentina e S100. Conclusões: Os achados macroscópicos, microscópicos e imuno-histoquímicos da neoplasia foram compatíveis com tumor estromal do cordão sexual pleomórfico pouco diferenciado. A causa da morte foi choque hipovolêmico de extensa hemorragia retroperitoneal e trombose neoplásica podem ter contribuído para o desfecho fatal. Para nosso conhecimento, este é o primeiro relato de tumor do cordão sexual estroma em felinos não domésticos.

Comparative leukocyte morphometric analysis between endemic Anurans from Brazil and the invasive species Lithobates catesbeianus / Análise morfométrica comparada entre Anuros endêmicos do Brasil e a espécie invasora Lithobates catesbeianus

Amphibians are potentially reliable and efficient bioindicators. Existing anuran white blood cell morphology studies are limited, with only a few morphometric studies available. We employed morphometric techniques to characterize leukocytes of selected Neotropical anurans from Brazil and compare our findings with the exotic American Bullfrog (Lithobates catesbeianus), genus Ranidae. We compared blood smears of 28 specimens from six different genera (Hyla, Phyllomedusa, Hypsiboas, Scinax, Physalaemus, and Proceratophrys) with samples from L. catesbeianus. Leukocyte average diameter was calculated by an image analysis software. One-way analyses of variance and Bonferroni tests were used on statistical analyses. Lymphocytes, neutrophils, eosinophils, and basophils were significantly smaller than the reference ranges reported for other amphibian genera, including Lithobathes, whereas monocyte diameters did not differ significantly between genera. This is the first study to evaluate leukocyte morphometrics of Brazilian anuran species. Our findings suggest that geographical separation could possibly influence leukocyte morphometry.(AU)

Anfíbios são indicadores ambientais potencialmente confiáveis e eficientes. Estudos referentes à morfologia de leucócitos de anuros são limitados, com poucos estudos morfométricos disponíveis em literatura. O presente estudo empregou técnicas morfométricas para caracterizar leucócitos de anuros Neotropicais brasileiros selecionados e compará-los com a espécie exótica rã-touro (Lithobates catesbeianus), família Ranidae. Esfregaços sanguíneos de 28 espécimes pertencentes a seis gêneros diferentes (Hyla, Phyllomedusa, Hypsiboas, Scinax, Physalaemus e Proceratophrys) foram comparados com amostras de esfregaços de L. catesbeianus. A média do diâmetro dos leucócitos foi calculada por um software de análise de imagens. One-way e teste de Bonferroni foram utilizados para avaliação estatística. Linfócitos, neutrófilos, eosinófilos e basófilos mostraram-se significativamente menores que os valores de referência reportados em outros gêneros de anfíbios, incluindo Lithobathes; por outro lado, a média do diâmetro dos monócitos não demonstrou variação significativa entre os gêneros. Esse é o primeiro estudo de avaliação morfométrica de leucócitos em espécies de anuros brasileiros. Nossos resultados sugerem que a separação geográfica possivelmente influencia a morfometria leucocitária.(AU)

Histology of the gastrointestinal tract from Bothrops jararaca and Crotalus durissus / Aspectos histológicos do trato gastrointestinal de Bothrops jararaca e Crotalus durissus

Recent studies have discussed the importance of snakes, going beyond the context of Public Health (snakebites). Promising research demonstrates the utility of snake venom in several fields, including oncology, diagnosis, anticoagulant therapy, and pain treatment. Nevertheless, there are still gaps in the basic knowledge on these animals, specifically regarding the histological characterization of the gastrointestinal tract, which ultimately hinder comparative histology and pathology studies. In this context the present study intends to contribute with the advance of current knowledge on snake histology by describing and analyzing histological samples of the gastrointestinal tracts of Bothrops jararaca and Crotalus durissus. Samples were collected from 12 individuals (six from each species), up to 6 months of age and equally distributed between males and females. Histological slides were prepared from the organs collected and were stained with hematoxylin and eosin, periodic acid-Schiff and alcian blue. The slides were photographed with a high-resolution camera to create a portfolio representative of the histology of the gastrointestinal systems of these animals.(AU)

Na atualidade, a importância das serpentes extravasa a conotação em saúde pública (acidentes ofídicos), e pesquisas promissoras têm demonstrado a utilidade dos venenos das serpentes em diversas áreas como oncologia, diagnóstico, terapia anticoagulante e tratamento da dor. Ainda assim, existem lacunas no conhecimento básico sobre esses animais, tais como a caracterização histológica do seu sistema gastrointestinal, que se tornam obstáculos para estudos nos campos da histologia e patologia comparadas. Nesse contexto, o presente trabalho pretende contribuir com o avanço do conhecimento sobre histologia de serpentes a partir da descrição e análise histológica de amostras do trato gastrointestinal de exemplares das espécies Bothrops jararaca e Crotalus durissus. Para tanto, foram coletadas amostras de 12 indivíduos com até seis meses de idade, seis por espécie (distribuídos igualmente entre machos e fêmeas). A partir dos órgãos colhidos, lâminas histológicas foram preparadas e coradas pela técnica de hematoxilina e eosina, bem como PAS com Alcian Blue. As lâminas foram fotografadas por câmera de alta resolução, resultando em um portfólio representativo da histologia do sistema gastrointestinal desses animais.(AU)

Epizootic amebiasis outbreak in wild black howler monkeys (Alouatta caraya) in a wildlife facility during captivity prior to translocation - Recommendations to wildlife management programs / Surto epizoótico de amebíase em Bugio preto (Alouatta caraya) provenientes de vida livre durante o cativeiro prévio a translocação - Recomendações a programas de manejo de fauna

The capture and quarantine of non-human primates could be necessary in some circumstances including those required under environmental permit. Mortality is undesirable for wildlife management programs and could be related to opportunistic pathogens, for example, deaths due to intestinal protozoa infection outbreaks as described here. Parasitological, necroscopic, microbiological, and molecular tests were used in the diagnosis of severe necrotic enteritis leading to death of three female and two male black howler monkeys (Alouatta caraya) captured and held in quarantine prior to translocation. Parasitological tests showed the presence of cysts of Entamoeba histolytica/dispar (5/5), Entamoeba coli (5/5) and Giardia duodenalis (1/5). Necroscopic assessment revealed areas of severe multifocal necrosis in the intestinal mucosa and submucosa. Histopathological examination revealed the presence of structures morphologically compatible to Entamoeba spp. in all individuals examined. Furthermore, G. duodenalis (1/5) was demonstrated by the nested PCR technique. During temporary captivity of non-human primates in management programs, proper handling protocols, including fast or immediate destination, are suggested in order to mitigate the negative effects of stress and decrease the risk of infections.(AU)

Óbitos por infecções causadas por protozoários intestinais são indesejáveis para programas de manejo de fauna, exigidos no âmbito do licenciamento ambiental e que demandam a captura e quarentena de primatas não humanos. Exames coproparasitológicos, necroscópicos, microbiológicos e moleculares foram utilizados para a confirmação do diagnóstico de uma severa enterite necrótica que levou a óbito três fêmeas e dois machos de Alouatta (A.) caraya capturados e mantidos em quarentena prévia à translocação. Exames coproparasitológicos revelaram a presença de cistos de Entamoeba (E.) histolytica/dispar (5/5), Entamoeba (E.) coli (5/5) e Giardia (G.) duodenalis (1/5). A avaliação necroscópica revelou áreas de necrose multifocal severa na mucosa e submucosa intestinal. A análise microscópica revelou a presença de estruturas morfologicamente compatíveis com trofozoítos do gênero Entamoeba spp. em todos os indivíduos examinados. Além disso, G. duodenalis (1/5) foi demonstrada pela técnica de Nested PCR. Sugere-se que quando for necessário o cativeiro temporário de primatas, deverão ser adotados protocolos de manejo adequados buscando a destinação imediata dos animais, de moto a mitigar os efeitos negativos do estresse e reduzir o risco da ocorrência de infecções.(AU)

Histological aspects of the mucosa of the spermaceti chamber of a dwarf sperm whale / Aspectos histológicos da mucosa da câmera do espermacete de cachalote-anão

The sound producing apparatus of the dwarf sperm whale (Kogia sima) presents a complex anatomic structure composed of melon, spermaceti, phonic lips, vocal cap, case, papillae, spermaceti chamber and other airspaces, as well as facial muscles involved in sound production. The spermaceti chamber rests on the caudal portion of the premaxilla, with part of its mucosa covered with spherical/oval-shaped structures (approximately 1 to 2 mm in diameter), compatible with vesicles (previously referred to as "papillae"). Macroscopical examination revealed whitish, firm, widely and irregularly distributed vesicular mucosa on the premaxillary portion of the spermaceti chamber of a K. sima specimen stranded on the coast of Santos (southeastern Brazilian coast). Upon microscopic examination, walls of connective tissue with abundant type I collagen forming vesicles with an internal space or cavity filled with a small amount of eosinophilic substance compatible with mucoproteic fluid were observed. The base of such vesicles presented glands within the connective tissue, probably responsible for fluid production. This study describes the histology of the mucosa of the spermaceti chamber of a K. sima specimen and characterizes the glands associated with fluid production.(AU)

O sistema de produção sonora do cachalote-anão (Kogia sima) apresenta uma complexa estrutura anatômica composta por melão, espermacete, lábios fônicos, "vocal cap", "case", papilas, câmara do espermacete e outros espaços aéreos, além de músculos faciais envolvidos na produção sonora. A câmara do espermacete localiza-se na porção caudal da pré-maxila, apresentando parte de sua mucosa recoberta por estruturas esférico-ovaladas de aproximadamente 1 a 2 mm de diâmetro, compatíveis com vesículas (previamente denominadas "papilas"). Ao exame macroscópico de um espécime de K. sima encalhado no litoral de Santos (sudeste da costa brasileira), foi identificada mucosa esbranquiçada e firme ao corte, ampla e irregularmente distribuída na porção pré-maxilar da câmara do espermacete. Ao exame microscópico foram observadas vesículas compostas por abundante tecido conectivo de colágeno tipo I, dando origem a um espaço interno ou cavidade, contendo pequena quantidade de substância eosinófila, compatível com fluido mucoprotêico. Estruturas glandulares foram observadas em tecido conjuntivo na base das vesículas, provavelmente responsáveis pela produção do fluido observado no interior das mesmas. Esse estudo caracteriza histologicamente a mucosa da câmara do espermacete de um espécime de K. sima e as glândulas relacionadas a sua produção secretória.(AU)

MOLECULAR IDENTIFICATION OF Pseudoterranova azarasi LARVAE IN COD (Gadus sp.) SOLD FOR HUMAN CONSUMPTION IN BRAZIL / Identificação molecular de larva de Pseudoterranova azarasi em bacalhau (Gadus sp.) vendido para consumo humano no Brasil

Anisakiasis and Pseudoterranovosis are human diseases caused by the ingestion of live Anisakidae larvae in raw, undercooked or lightly marinated fish. Larvae were collected from one salted cod sold for human consumption in a Sao Paulo market in 2013. One section of one brownish larva was used for molecular analyses. The partial COX2 gene sequence from the larva had a nucleotide identity of 99.8 % with Pseudoterranova azarasi, which belongs to the Pseudoterranova decipiens species complex. The risk of allergy when consuming dead larvae in salted fish is not well known and should be considered.

Os termos Anisakiasis e Pseudoterranovosis são utilizados para doença em humanos causada pela ingestão de larvas vivas de parasitas da Família Anisakidae em peixes crus, mal cozidos ou levemente marinados. As larvas foram coletadas de bacalhau salgado vendido para consumo humano num mercado de São Paulo em 2013. Uma parte da larva de cor castanha foi utilizada em análises moleculares. A sequencia parcial do gene COX2 obtida da larva mostrou 99,8% de identidade de nucleotídeos com Pseudoterranova azarasi, que faz parte do complexo de espécies Pseudoterranova decipiens. O risco de reação alérgica envolvido no consumo de larvas mortas em peixe salgado não é bem conhecido e deve ser considerado.

The use of singleplex and nested PCR to detect Batrachochytrium dendrobatidis in free-living frogs

Many microorganisms are able to cause diseases in amphibians, and in the past few years one of the most reported has been Batrachochytrium dendrobatidis. This fungus was first reported in Brazil in 2005; following this, other reports were made in specimens deposited in museum collections, captive and free-living frogs. The aim of this study was to compare singleplex and nested-PCR techniques to detect B. dendrobatidis in free-living and apparently healthy adult frogs from the Brazilian Atlantic Forest. The sample collection area was a protected government park, with no general entrance permitted and no management of the animals there. Swabs were taken from the skin of 107 animals without macroscopic lesions and they were maintained in ethanol p.a. Fungal DNA was extracted and identification of B. dendrobatidis was performed using singleplex and nested-PCR techniques, employing specific primers sequences. B. dendrobatidis was detected in 61/107 (57%) and 18/107 (17%) animals, respectively by nested and singleplex-PCR. Nested-PCR was statistically more sensible than the conventional for the detection of B. dendrobatidis (Chi-square = 37.1; α = 1%) and the agreement between both techniques was considered just fair (Kappa = 0.27). The high prevalence obtained confirms that these fungi occur in free-living frogs from the Brazilian Atlantic Forest with no macroscopic lesions, characterizing the state of asymptomatic carrier. We concluded that the nested-PCR technique, due to its ease of execution and reproducibility, can be recommended as one of the alternatives in epidemiological surveys to detect B. dendrobatidis in healthy free-living frog populations.

Detection of anti-Toxoplasma gondii antibodies in experimentally and naturally infected non-human primates by Indirect Fluorescence Assay (IFA) and indirect ELISA / Detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii por meio das técnicas de Imunofluorescência Indireta e ELISA Indireto em primatas experimentalmente e naturalmente infectados

The Indirect Fluorescence Assay (IFA) and the indirect ELISA were comparatively used to detect IgG and IgM antibodies for Toxoplasma gondii in experimentally and naturally infected primates. In the experimentally infected group, antibodies of diagnostic value were detected at day 9 post-infection (PI) with the IFA (IgG and IgM) and with IgG-ELISA. IgM-ELISA detected antibodies for T. gondii starting at day 3 PI until the end of the experiment (102 days PI). Of the 209 naturally infected sera tested, from many zoos of State of Sao Paulo, 64.59 and 67.94 percent were positive in the IgG-IFA test and IgG-ELISA respectively. IgM-ELISA test detected seropositivity in 52.63 percent of the sera although IgM-IFA test detected it in only in 0.96 percent of the samples. The differential toxoplasmosis diagnosis was accomplished with Neospora caninum by IFA, observing 61 (29.2 percent) seropositive animals for this parasite and 149 (70.8 percent) negative. Sixty animals were positive for both T. gondii and N. caninum. Pneumonia, splenomegaly, and intestinal ulcers were macroscopically observed. Unremarkable interstitial pneumonia, enteritis, colitis, splenitis, and glomerulitis were microscopically observed. The immunohistochemical stain could not detect the presence of T. gondii in the tissues of the animals infected experimentally.

Detectou-se anticorpos das classes IgG e IgM anti-Toxoplasma gondii em primatas experimentalmente e naturalmente infectados, utilizando-se como técnicas comparativas a RIFI e o ELISA-teste. No grupo dos primatas experimentalmente infectados, anticorpos de valor diagnóstico foram detectados a partir do 9º dia de infecção tanto na RIFI (IgG e IgM) como no ELISA-IgG. O ELISA IgM detectou anticorpos a partir do 3º dia de infecção até o final do experimento (102 dias pós-infecção). Dos 209 soros dos primatas naturalmente infectados, de diversos zoológicos do Estado de São Paulo, 64,59 e 67,94 por cento mostraram-se positivos na RIFI-IgG e no ELISA-IgG, respectivamente. O ELISA-IgM detectou soropositividade em 52,63 por cento dos soros ao passo que a RIFI-IgM detectou apenas 0,96 por cento. Foi realizado também diagnóstico diferencial para Neospora caninum, através da RIFI, observando-se 61 (29,2 por cento) animais soropositivos para este parasita e 149 (70,8 por cento) animais negativos. Sessenta animais foram positivos para T. gondii e N. caninum. Pneumonia, esplenomegalia e úlceras intestinais foram observadas macroscopicamente. Pneumonia intersticial, enterite, colite, esplenite e glomerulite foram os achados microscópicos. A imunoistoquímica não revelou a presença do T. gondii nos tecidos dos animais experimentalmente infectados.

Detection of anti-Toxoplasma gondii antibodies inexperimentally and naturally infected non-human primates by Indirect Fluorescence Assay (IFA) and indirect ELISA / Detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii por meio das técnicas de Imunofluorescência Indireta e ELISA Indireto em primatas experimentalmente e naturalmente infectados

The Indirect Fluorescence Assay (IFA) and the indirect ELISA were comparatively used to detect IgG and IgM antibodies for Toxoplasma gondii in experimentally and naturally infected primates. In the experimentally infected group, antibodies of diagnostic value were detected at day 9 post-infection (PI) with the IFA (IgG and IgM) and with IgG-ELISA. IgM-ELISA detected antibodies for T. gondii starting at day 3 PI until the end of the experiment (102 days PI). Of the 209 naturally infected sera tested, from many zoos of State of Sao Paulo, 64.59 and 67.94% were positive in the IgG-IFA test and IgG-ELISA respectively. IgM-ELISA test detected seropositivity in 52.63% of the sera although IgM-IFA test detected it in only in 0.96% of the samples. The differential toxoplasmosis diagnosis was accomplishedwith Neospora caninum by IFA, observing 61 (29.2%) seropositive animals for this parasite and 149 (70.8%) negative. Sixty animals were positive for both T. gondii and N. caninum. Pneumonia, splenomegaly, and intestinal ulcers were macroscopically observed. Unremarkable interstitial pneumonia, enteritis, colitis, splenitis, and glomerulitis were microscopically observed. The immunohistochemical stain could not detect the presence of T. gondii in the tissues of the animals infected experimentally.

Detectou-se anticorpos das classes IgG e IgM anti-Toxoplasma gondii em primatas experimentalmente e naturalmente infectados, utilizando-se como técnicas comparativas a RIFI e o ELISA-teste. No grupo dos primatas experimentalmente infectados, anticorpos de valor diagnóstico foram detectados a partir do 9º dia de infecção tanto na RIFI (IgG e IgM) como no ELISA-IgG. O ELISA IgM detectou anticorpos a partir do 3º dia de infecção até o final do experimento (102 dias pós-infecção). Dos 209 soros dos primatas naturalmente infectados, de diversos zoológicos do Estado de São Paulo, 64,59 e 67,94% mostraram-se positivos na RIFI-IgG e no ELISA-IgG, respectivamente. O ELISA-IgM detectou soropositividade em 52,63% dos soros ao passo que a RIFI-IgM detectou apenas 0,96%. Foi realizado também diagnóstico diferencial para Neospora caninum, através da RIFI, observando-se 61 (29,2%) animais soropositivos para este parasita e 149 (70,8%) animais negativos. Sessenta animais foram positivos para T. gondii e N. caninum. Pneumonia, esplenomegalia e úlceras intestinais foram observadas macroscopicamente. Pneumonia intersticial, enterite, colite, esplenite e glomerulite foram os achados microscópicos. A imunoistoquímica não revelou a presença do T. gondii nos tecidos dos animais experimentalmente infectados.

Detection of Mycobacterium avium in pet birds / Detecção de Mycobacterium avium em aves de companhia

The present study is a report on the presence of Mycobacterium avium in four birds of the psittaciform order kept as pets. Anatomopathological diagnosis showed lesions suggestive of the agent and presence of alcohol-acid resistant bacilli (AARB) shown by the Ziehl-Neelsen staining. The identification of Mycobacterium avium was performed by means of PRA (PCR Restriction Analysis). DNA was directly extracted from tissue of the lesions and blocked in paraffin. The role of this agent in pet bird infection is discussed, as well as its zoonotic potential.

Este estudo relata a presença de Mycobacterium avium em quatro aves da ordem Psitaciformes, mantidos como animais de estimação. O exame anatomopatológico revelou a presença de bacilos álcool ácido resistentes na coloração de Ziehl-Neelsen, e o diagnostico definitivo foi feito pelo método PRA (PCR Restriction Analysis) a partir de tecidos emblocados em parafina. Este estudo visa alertar o possível potencial zoonótico deste agente em aves mantidas domiciliadas.

Heartworm (Dirofilaria immitis) disease in a Brazilian oncilla (Leopardus tigrinus) / Doença do Verme do Coração (Dirofilaria immitis) em gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) no Brasil

Heartworm disease is caused by the intravascular nematode Dirofilaria immitis, a pathogen of public health importance usually associated to domestic dogs and cats, and to a lesser extend to other mammal species. The oncilla (Leopardus tigrinus) is a threatened neotropic felid species that naturally occurs in Brazil. Here, we report the encounter of adult and larval stages of heartworms in a female specimen of L. tigrinus, probable of free-ranging origin, from Ubatuba, São Paulo, Brazil, which died showing clinical signals compatible with heartworm disease. This was the first reported case of D. immitis infection and associated disease in L. tigrinus, also suggesting that the oncilla acted as a definitive host for this parasite. The present findings confirmed D. immitis as a pathogenic agent for this felid species, thus supporting the recommendation for the inclusion of diagnostic testing for this pathogen in routine health screening procedures for captive and free-ranging oncillas in Brazil, especially in those localities where climate conditions support the occurrence of the parasite. Potential reservoirs as oncillas are established beyond the reach of veterinary care, thus representing a continuing risk for domestic animals and humans acquiring heartworm infection. We encourage further serologic and molecular studies aiming to establish D. immitis prevalences in L. tigrinus and other wild carnivores in the region of Ubatuba, as well as ecological and veterinary studies to access the role of this pathogen for the survival of this threatened felid species.

A doença do verme do coração é causada pelo nematódeo intravascular Dirofilaria immitis, um patógeno de importância em Saúde Pública geralmente associado a cães e gatos domésticos e, em menor extensão, a outras espécies de mamíferos. O gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) é uma espécie ameaçada de felídeo neotropical que ocorre naturalmente no Brasil. Aqui relatamos o encontro de estágios adultos e larvais de vermes do coração em uma fêmea de L. tigrinus, provavelmente de vida livre e originária de Ubatuba, São Paulo, Brasil, que veio a óbito demonstrando sinais clínicos compatíveis desta doença. Este é o primeiro caso relatado de infecção e doença associada com D. immitis em L. tigrinus, sugerindo também que o gato-do-mato-pequeno agiu como hospedeiro definitivo para este parasita. Estes achados confirmaram que D. immitis é um agente patogênico para esta espécie de felino, sugerindo a recomendação para a inclusão de testes diagnósticos para este patógeno em procedimentos rotineiros de avaliação da saúde para gatos-do-mato-pequenos mantidos em cativeiro e de vida livre no Brasil, especialmente em localidades onde as condições climáticas permitam a ocorrência do parasita. Os gatos-do-mato-pequenos são potenciais reservatórios da D. immitis, mas vivem fora do alcance veterinário, representando desta forma um risco contínuo para animais domésticos e humanos. Encorajamos a realização de outros estudos epidemiológicos a fim de estabelecer as prevalências de infecção por D. immitis em L. tigrinus e outros carnívoros selvagens na região de Ubatuba, assim como estudos ecológicos e médicos veterinários para se acessar o papel deste patógeno para a sobrevivência desta espécie ameaçada de felídeo.